梯度PCR儀
梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴(kuò)增儀。PCR反應(yīng)能否成功,退火溫度是關(guān)鍵,梯度PCR儀每個(gè)孔的溫度可以在指定范圍內(nèi)按照梯度設(shè)置,根據(jù)結(jié)果,一步就可以摸索出最適反應(yīng)條件。一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱(chēng)之為梯度PCR儀。因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同的DNA片段其最適合的退火溫度不同,通過(guò)設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增,從而一次性PCR擴(kuò)增就可以篩選出表達(dá)量高的最適合退火溫度進(jìn)行有效的擴(kuò)增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增,這樣可節(jié)省試驗(yàn)時(shí)間、提高實(shí)驗(yàn)效率,又節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本。在不設(shè)置梯度的情況下亦可當(dāng)做普通的PCR用。梯度PCR儀多應(yīng)用于科研、教學(xué)機(jī)構(gòu)。
目前,國(guó)內(nèi)用戶比較多的進(jìn)口品牌主要有伯樂(lè),艾本德,TECHNE等,09前還有一個(gè)MJ,不過(guò)現(xiàn)在已經(jīng)被伯樂(lè)收購(gòu)了。國(guó)產(chǎn)梯度PCR儀較專(zhuān)業(yè)的生產(chǎn)企業(yè)有:西安天隆、北京六一等幾家專(zhuān)業(yè)的PCR生產(chǎn)企業(yè)。
國(guó)產(chǎn)梯度PCR儀
PCR儀適用于分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品工業(yè)、司法科學(xué)、生物技術(shù)、環(huán)境科學(xué)、微生物學(xué)、臨床診斷、流行病學(xué)、遺傳學(xué)、基因芯片、基因檢測(cè)、基因克隆、基因表達(dá)等領(lǐng)域以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Picymerase Chain Reaction , PCR)為特征的、以檢測(cè)DNA/RNA為目的的各種病原體檢測(cè)及基因分析。
梯度PCR儀TC-512型除具有上述標(biāo)準(zhǔn)PCR儀功能外,其梯度模塊還能同時(shí)進(jìn)行多達(dá)12個(gè)不同退火溫度的PCR反應(yīng),在梯度模塊上,可實(shí)現(xiàn)對(duì)梯度溫度和梯度寬度等參數(shù)的調(diào)整,自由編程12道溫度,梯度實(shí)現(xiàn)不同樣品的退火溫度并同時(shí)進(jìn)行熱循環(huán)。僅一次實(shí)驗(yàn)就能確定特定體系相應(yīng)的最優(yōu)退火溫度。從而可在短時(shí)間內(nèi)對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化,大大提高PCR科研效率。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀原理:
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析。
在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上添加了熒光染料或熒光探針。熒光染料能特異性摻入DNA雙鏈,發(fā)出熒光信號(hào),而不摻入雙鏈中的染料分子不發(fā)出熒光信號(hào),從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物增加完全。
FUNGLYN 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀技術(shù)創(chuàng)新:
* 采用新型半導(dǎo)體控溫技術(shù),控溫精度達(dá)到0.01℃,保證了擴(kuò)增反應(yīng)的精確性;
* 采取光纖導(dǎo)入的方式,激發(fā)光源LED和鹵鎢燈可選,采用側(cè)底部激發(fā)的方式,減少了光的邊緣效應(yīng),最大限度避免了光信號(hào)的衰減,在解決了光強(qiáng)均一性問(wèn)題的同時(shí),延長(zhǎng)了鹵素?zé)舻氖褂脡勖?br />* 六區(qū)獨(dú)立溫度控制,可設(shè)置不同的反應(yīng)條件,避免了熱傳導(dǎo)過(guò)程中的邊緣效應(yīng),提升了溫度控制精度、樣品溫度均一性等性能。
* 先進(jìn)的熒光檢測(cè)系統(tǒng),新型耐用的鹵鎢燈,-20℃冷態(tài)低溫CCD為熒光檢測(cè)裝置,實(shí)現(xiàn)真正意義上的“實(shí)時(shí)、同步”。
* 12列溫度梯度功能,可同時(shí)運(yùn)行12個(gè)不同的退火溫度,在一次實(shí)驗(yàn)中即可摸索出最適宜的退火溫度,為用戶提供了最大的便利。
* 多通道檢測(cè),最多可升級(jí)到六通道;
* 高分辨率的熔解曲線軟件分析功能預(yù)留,可根據(jù)分析結(jié)果調(diào)整反應(yīng)溫度,重新設(shè)定信號(hào)采集點(diǎn),消除引物二聚體,非特異性擴(kuò)增等的影響,使得絕大多數(shù)擴(kuò)增反應(yīng)用SYBR GREEN 1就能夠完成,省去了合成探針等的成本;
* 智能化的斷電保護(hù)功能,意外斷電時(shí)可自動(dòng)存儲(chǔ)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,開(kāi)機(jī)后可恢復(fù)開(kāi)始實(shí)驗(yàn);
* 內(nèi)嵌式電腦設(shè)計(jì),windows XP系統(tǒng)操作方便;
* 試劑耗材等需求開(kāi)放,兼容國(guó)內(nèi)外品牌;
* 體積小,噪音低,重量只有18KG,適合任何實(shí)驗(yàn)室。
溫度控制技術(shù)闡述---全球首創(chuàng)的六區(qū)控溫技術(shù)(專(zhuān)利號(hào): 01274389.5):
1、溫度控制是PCR實(shí)驗(yàn)中的主要因素,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生直接影響。
Funglyn Biotech所有產(chǎn)品均采用“6區(qū)獨(dú)立溫度控制”技術(shù),避免了熱傳導(dǎo)過(guò)程中的邊緣效應(yīng),有效提升了控溫精度及孔間溫度均一性,從而保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。
2、將96孔樣品板等分為16(4x4)x 6個(gè)模塊。每個(gè)模塊都有自己的溫度控制系統(tǒng),既可以單獨(dú)設(shè)置不同的溫度,又可同時(shí)進(jìn)行單一的溫度條件實(shí)驗(yàn)。