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核酸蛋白分析儀的原理
[ 2012/2/22 16:47:46 ] [轉(zhuǎn)載請注明來源:就是要儀器網(wǎng)]

DU640型核酸/蛋白分析儀由美國Backman公司生產(chǎn),整體的系統(tǒng)設(shè)計(jì)是根據(jù)微聚焦光束技術(shù)確保能精確地測定至少5微升的樣品,用于醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)。配有強(qiáng)力而豐富的應(yīng)用軟件,具有高精確性、靈活性。波長范圍:190--1100nm.基本功能:1.從標(biāo)準(zhǔn)曲線到蛋白濃度分析;2.核酸分析;3.DNA/RNA/寡核苷酸定量;4.DNA理論解鏈分析(Tm);5.標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)力學(xué)研究。

核酸蛋白分析儀原理基于被測組分和背景電解質(zhì)的吸光度不同,當(dāng)被檢測組分通過檢測窗時(shí),吸光度發(fā)生變化服從朗伯-比爾定律,即在一定的實(shí)驗(yàn)條件下,吸光度與被測組分的濃度成正比。

核酸分析儀用于核酸蛋白檢測
紫外-可見光分光光度計(jì)在生物科技中可用于測定核酸和蛋白質(zhì)的濃度。
首先,核酸的基本結(jié)構(gòu)單位是核苷酸。核苷酸由一個(gè)含氮堿基(嘌呤或嘧啶),一個(gè)戊糖(核糖或脫氧核糖)和一個(gè)或幾個(gè)磷酸組成。由于核酸的堿基具有共軛雙鍵,因而有紫外吸收的性質(zhì)。各種堿基、核苷和核苷酸的吸收光譜略有區(qū)別。核酸的紫外吸收峰在260nm附近,可用于測定核酸。根據(jù)260nm與280nm的吸收光度(A260)可判斷核酸純度。

再談蛋白質(zhì),構(gòu)成它的組成是氨基酸,其中的種類包含酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸,這幾種芳香族氨基酸的苯環(huán)含有共軛雙鍵,使蛋白質(zhì)具有吸收紫外光的性質(zhì)。吸收高峰在280nm處,其吸光度(即光密度值)與蛋白質(zhì)含量成正比。所以,紫外吸收法是280 nm 的光吸收法,含有核酸的蛋白質(zhì)溶液使用280 和260 nm 的吸收差法較好。蛋白質(zhì)的稀溶液采用215 與225 nm 的吸收差法。
 
此外,蛋白質(zhì)溶液在238nm的光吸收值與肽鍵含量成正比。利用一定波長下,蛋白質(zhì)溶液的光吸收值與蛋白質(zhì)濃度的正比關(guān)系,可以進(jìn)行蛋白質(zhì)含量的測定。紫外吸收法簡便、靈敏、快速,不消耗樣品,測定后仍能回收使用。
 
還有一些測定蛋白質(zhì)的方法,是通過蛋白質(zhì)與一些物質(zhì)的作用產(chǎn)生顏色,然后在此有色光光譜內(nèi)測定吸光度。將已知濃度的蛋白質(zhì)溶液稀釋幾個(gè)倍數(shù),與物質(zhì)作用后作為標(biāo)準(zhǔn)品,測定吸光度做出一條曲線,然后未知溶液的濃度就可通過吸光度來得出。這些方法包括,凱氏定氮法,考馬斯亮藍(lán)法(Bradford),F(xiàn)olin-酚試劑法(Lowry法)和BCA法。

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