光學(xué)顯微鏡的成象(幾何成象)原理
普通光學(xué)顯微鏡成像原理圖只有當(dāng)物體對(duì)人眼的張角不小于某一值時(shí),肉眼才能區(qū)別其各個(gè)細(xì)部,該量稱為目視分辨率ε。在最佳條件下,即物體的照度為50~70lx及其對(duì)比度較大時(shí),可達(dá)到1""""。為易于觀測(cè),一般將該量加大到2"""",并取此為平均目鏡分辨率。物體視角的大小與該物體的長(zhǎng)度尺寸和物體至眼睛的距離有關(guān)。有公式y(tǒng)=Lε距離L不能取得很小,因?yàn)檠劬Φ恼{(diào)節(jié)能力有一定限度,尤其是眼睛在接近調(diào)節(jié)能力的極限范圍工作時(shí),會(huì)使視力極度疲勞。對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)(正視)而言,最佳的視距規(guī)定為250mm(明視距離)。這意味著,在沒有儀器的條件下,目視分辨率ε=2""""的眼睛,能清楚地區(qū)分大小為0.15mm的物體細(xì)節(jié)。在觀測(cè)視角小于1""""的物體時(shí),必須使用放大儀器。放大鏡和顯微鏡是用于觀測(cè)放置在觀測(cè)人員近處應(yīng)予放大的物體的。[1]
2用途介紹
顯微鏡將微小物體或物體的微細(xì)部分高倍放大,以便觀察的儀器或設(shè)備。廣泛應(yīng)用于工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)及科學(xué)研究,在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)工作中也經(jīng)常使用。大致分為光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡。
光學(xué)顯微鏡以可見光為光源的顯微鏡觀察昆蟲的復(fù)眼。這是一種已具目鏡、物鏡和鏡筒等裝置,并固定在支架上的顯微鏡。原初顯微鏡觀察結(jié)果的記錄技術(shù)開始于繪制圖像和繪圖部件的發(fā)展.本世紀(jì)初才應(yīng)用黑白底片進(jìn)行攝影的顯微攝影技術(shù)。50年代染色標(biāo)本的彩色顯微攝影技術(shù)已被廣泛采用。相繼出現(xiàn)了大量黑白、彩色組織學(xué)、細(xì)胞學(xué)圖譜。細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖、游走與吞噬等生理活動(dòng)用電影記錄方法被記錄下來。由于現(xiàn)代信息技術(shù)發(fā)展?jié)B透到顯微鏡記錄技術(shù)中,使微觀生物世界方面的知識(shí)普及和科學(xué)研究有了極其眾多的先進(jìn)手段。
繪圖記錄方法
最早單眼目視標(biāo)本、另一眼目視紙面進(jìn)行繪圖記錄。這種方法對(duì)于老練的顯微鏡工作者來說是一種很有價(jià)值的記錄方法。后來出現(xiàn)了許多利用反射光進(jìn)行繪圖的方法和裝置。例如較為實(shí)用的、描繪大型教學(xué)掛圖的反射投影鏡頭種類很多。但基本原則就是用反光鏡或梭鏡將目鏡射出的物像投影到銀幕上加以描繪.這種裝置在基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)中用普通的小塊面鏡即可自制.
日本奧林巴斯顯微鏡公司出產(chǎn)的BH-2-DA型反光式繪圖裝置.這種裝置安裝在Olympus系列顯微鏡的鏡筒中間,經(jīng)過反光棱鏡將成像光束的主要光能投向反射光孔。在這裝置的光路中間插入所需倍率的目鏡,將物鏡造成的物像放大之后投向紙面.
顯徽鏡記錄方法由描繪方法已經(jīng)進(jìn)入到采用現(xiàn)代攝影技術(shù)、錄像技術(shù)、光密度掃描技術(shù)以及其他更為先進(jìn)的信息頻譜轉(zhuǎn)換技術(shù)的階段,如圖像分析技術(shù).形態(tài)學(xué)研究中彩色顯微攝影技術(shù)具有巨大實(shí)用價(jià)值。在顯微鏡設(shè)計(jì)中不斷創(chuàng)造著保證物像的清晰度和彩色精確的自動(dòng)曝光設(shè)備.顯微電影攝制方法對(duì)生活細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)方式、運(yùn)動(dòng)速度、增殖分裂周期中染色體以及其他細(xì)胞小器官的動(dòng)態(tài)觀察不可能用其他方法代替。顯微分光記錄技術(shù)和圖像分析技術(shù)是定量觀察細(xì)胞代謝的先進(jìn)記錄方法。由于顯微分光技術(shù)和圖像分析技術(shù)的價(jià)錢昂貴,還未得到更廣泛的使用。
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